Αλγόριθμος για τον προσδιορισμό της πρωτεΐνης στα ούρα με τη μέθοδο express.

Στόχος:Έγκαιρη διάγνωση όψιμης κύησης.

Εξοπλισμός:δοχείο, αποστειρωμένο βάζο, βάση με δοκιμαστικούς σωλήνες, φιάλη με 30% σουλφοσαλικυλικό ή οξικό οξύ, πιπέτα, καυστήρα αλκοόλης.

1. Εξηγήστε στην έγκυο για την ανάγκη αυτής της μελέτης.

2. Ζητήστε από την έγκυο να συλλέξει τα ούρα σε ένα αποστειρωμένο βάζο.

3. Ρίξτε 4-5 ml στον δοκιμαστικό σωλήνα. δοκιμή ούρων.

4. Δοκιμή με σουλφοσαλικυλικό οξύ:

Προσθέστε 6-10 σταγόνες σουλφοσαλικυλικού οξέος 30% στον δοκιμαστικό σωλήνα με τα ούρα. Εάν υπάρχει πρωτεΐνη στα ούρα, θα σχηματιστεί ίζημα ή θόλωση.

5. Δοκιμή με οξικό οξύ:

6-10 ml ούρων χύνονται σε δοκιμαστικό σωλήνα και βράζονται σε καυστήρα αλκοόλης - τα ούρα που περιέχουν πρωτεΐνη γίνονται θολά. Προσθέστε μερικές σταγόνες διαλύματος οξικού οξέος 3-5% σε θολά ούρα. Εάν η θολότητα έχει εξαφανιστεί, το τεστ είναι αρνητικό.

Αλγόριθμος για τον προσδιορισμό της βιολογικής δραστηριότητας της μήτρας για τον τοκετό. «Τεστ ωκυτοκίνης».

Στόχος:προσδιορισμός της ετοιμότητας του οργανισμού για τον τοκετό.

Εξοπλισμός:Αλατούχο διάλυμα 0,9% - 500,0, 5 μονάδες ωκυτοκίνης, σύριγγα 10,0, 70% οινόπνευμα, βαμβάκι, ρολόι με δεύτερο χέρι.

1. Εξηγήστε στην έγκυο για την ανάγκη αυτής της μελέτης.

2. Ζητήστε από την έγκυο να εξασφαλίσει πλήρη συναισθηματική και σωματική ανάπαυση για 15 λεπτά ενώ είναι ξαπλωμένη ανάσκελα. Αυτό είναι απαραίτητο για την πρόληψη πιθανών συσπάσεων της μήτρας λόγω της επίδρασης διαφόρων παραγόντων.

3. Γεμίστε μια σύριγγα 10 γραμμαρίων με 10 ml. διάλυμα που παρασκευάζεται με ρυθμό 0,01 IU ωκυτοκίνης ανά 1 ml. ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου. Το διάλυμα παρασκευάζεται ως εξής:

5 μονάδες (1 ml) ωκυτοκίνης αραιώνονται σε 500 ml. ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου (5 ID: 500,0 = 0,01 ΜΟΝΑΔΑ: 1 ml). Από τη φιάλη, χρησιμοποιήστε μια σύριγγα 10 γραμμαρίων για να τραβήξετε 10,0 από το διάλυμα που προκύπτει για τη δοκιμή.

4. Πραγματοποιήστε φλεβοκέντηση και, βεβαιώνοντας ότι δεν προκάλεσε συσπάσεις της μήτρας, ξεκινήστε την ενδοφλέβια χορήγηση διαλύματος ωκυτοκίνης.

5. Προσδιορίστε το χρόνο έναρξης χορήγησης του διαλύματος.

6. “Jerky”, 1 ml. σε διαστήματα 1 λεπτού, εγχύστε το διάλυμα, αλλά όχι περισσότερο από 5 ml. Σταματήστε τη χορήγηση του διαλύματος όταν εμφανιστούν συσπάσεις της μήτρας.

7. Το τεστ θεωρείται θετικό εάν καταγραφούν συσπάσεις της μήτρας μέσα στα πρώτα 3 λεπτά από την έναρξη των ενέσεων και ο τοκετός γίνει μέσα στις επόμενες 24-48 ώρες. Οι συσπάσεις της μήτρας που εμφανίζονται μετά από 4 λεπτά από την εισαγωγή θεωρούνται αρνητικό τεστ - ο τοκετός θα συμβεί σε 3 έως 8 ημέρες.

8. Καταγράψτε το αποτέλεσμα στην κύρια τεκμηρίωση.

5.4. Αλγόριθμος για την αξιολόγηση της «ωριμότητας» του τραχήλου της μήτρας.

Στόχος:προσδιορισμός της ετοιμότητας του τραχήλου της μήτρας για τον τοκετό.

Εξοπλισμός:απολυμαντικό, κουρέλια, αποστειρωμένα γάντια, τραπέζι.

1. Εξηγήστε στην έγκυο την ανάγκη αυτής της διαδικασίας.

2. Περιποιηθείτε την καρέκλα με ένα πανί εμποτισμένο σε διάλυμα υποχλωριώδους ασβεστίου 0,5%

3. Τοποθετήστε μια καθαρή πάνα στην καρέκλα.

4. Τοποθετήστε την έγκυο στη γυναικολογική καρέκλα.

5. Αντιμετωπίστε τα εξωτερικά γεννητικά όργανα με ένα από τα απολυμαντικά διαλύματα.

6. Φοράτε αποστειρωμένα γάντια.

7. Με το αριστερό σας χέρι, απλώστε τα μεγάλα χείλη με το πρώτο και το δεύτερο δάχτυλο και εισάγετε το 2-3ο δάχτυλο του δεξιού σας χεριού στον κόλπο.

Πολλές ασθένειες εμφανίζονται χωρίς έντονες κλινικές εκδηλώσεις, επομένως ο προσδιορισμός της πρωτεΐνης στα ούρα με σκοπό την έγκαιρη ανίχνευση και θεραπεία της παθολογικής κατάστασης είναι ένα σημαντικό σημείο για την πρακτική ιατρική.

Η πρωτεΐνη στα ούρα μπορεί να προσδιοριστεί με ποιοτικές και ποσοτικές μεθόδους.

Ποιοτικές μέθοδοι

Υπάρχουν επί του παρόντος περίπου 100 γνωστές ποιοτικές αντιδράσεις στην πρωτεΐνη. Περιλαμβάνουν κατακρήμνιση πρωτεϊνών με φυσική ή χημική δράση. Με μια θετική αντίδραση, εμφανίζεται θολότητα.

Τα πιο κατατοπιστικά τεστ είναι:

1. Με σουλφοσαλικυλικό οξύ. Θεωρείται το πιο ευαίσθητο και με τη βοήθειά του είναι δυνατό να προσδιοριστούν ακόμη και οι μικρότερες ποσότητες πρωτεϊνικών σωμάτων στα ούρα. Η περιγραφή του αποτελέσματος με ίχνη παρουσίας πρωτεΐνης χαρακτηρίζεται με τον όρο "ωχρότητα" και με μεγαλύτερη ποσότητα - "ασθενώς θετική", "θετική" και με μεγάλη απώλεια πρωτεΐνης στα ούρα - "έντονα θετική αντίδραση" .
2. Με υποκατάστατο οξέος - ασεπτόλη. Ένα διάλυμα της ουσίας προστίθεται στα ούρα και όταν σχηματίζεται δακτύλιος στο όριο των διαλυμάτων, το δείγμα λέγεται θετικό.
3. Γκέλερ. Παράγεται χρησιμοποιώντας διάλυμα νιτρικού οξέος. Το αποτέλεσμα της διαδικασίας ερμηνεύεται παρόμοια με αυτό με το Aseptol. Μερικές φορές μπορεί να υπάρχει δακτύλιος όταν υπάρχει ουρικό άλας στο υγρό δοκιμής.
4. Με οξικό οξύ με προσθήκη διοξειδίου του θείου καλίου. Εάν η συγκέντρωση των ούρων είναι υψηλή κατά τη διεξαγωγή μιας τέτοιας δοκιμής, αραιώνεται, διαφορετικά μπορεί να προκύψει ψευδώς θετικό αποτέλεσμα, καθώς η αντίδραση θα είναι σε ουρικά άλατα και ουρικό οξύ.

Η εσφαλμένη εκτέλεση μιας τέτοιας εξέτασης μπορεί συχνά να δώσει εσφαλμένο αποτέλεσμα στα νεογνά, αφού τα ούρα τους σχηματίζονται με υψηλή περιεκτικότητα σε ουρικό οξύ.

Οι βασικοί κανόνες κατά τη διεξαγωγή δοκιμών είναι οι εξής: είναι απαραίτητο τα ούρα που εξετάζονται να είναι διαφανή, να έχουν ελαφρώς όξινο περιβάλλον (για αυτό, μερικές φορές προστίθεται μια μικρή ποσότητα οξικού οξέος), πρέπει να υπάρχουν δύο δοκιμαστικοί σωλήνες για παρακολούθηση.

Ποσοτικοποίηση

Όταν γίνεται εξέταση ούρων, προσδιορίζεται και η ολική πρωτεΐνη χρησιμοποιώντας ποσοτικές μεθόδους. Υπάρχουν αρκετά από αυτά, αλλά τα πιο συχνά χρησιμοποιούμενα είναι τα ακόλουθα:

1. Μέθοδος Esbach. Χρησιμοποιείται από τον 19ο αιώνα. Για να γίνει αυτό, τα ούρα και το αντιδραστήριο χύνονται σε ένα συγκεκριμένο δοκιμαστικό σωλήνα. Στη συνέχεια το μείγμα ανακινείται λίγο και αφήνεται σκεπασμένο για 24-48 ώρες. Το προκύπτον ίζημα μετράται με διαίρεση στον δοκιμαστικό σωλήνα. Το σωστό συμπέρασμα μπορεί να εξαχθεί μόνο με όξινα ούρα. Αυτή η τεχνική είναι αρκετά απλή, αλλά δεν έχει υψηλή ακρίβεια και είναι χρονοβόρα.
2. Μέθοδος Brandberg-Stolnikov. Με βάση τη δοκιμή Heller, η οποία σας επιτρέπει να λάβετε ένα αποτέλεσμα με συγκέντρωση πρωτεΐνης μεγαλύτερη από 3,3 mg%. Αργότερα αυτή η μέθοδος τροποποιήθηκε και απλοποιήθηκε.
3. Οι νεφελομετρικές μέθοδοι για τον προσδιορισμό της ποσότητας της πρωτεΐνης χρησιμοποιούνται ευρέως.

Για να κατανοήσετε πλήρως την ποσότητα πρωτεΐνης, είναι καλύτερο να χρησιμοποιήσετε ένα τεστ ούρων για καθημερινή πρωτεΐνη.

Για το σωστό αποτέλεσμα, χύνεται η πρώτη πρωινή μερίδα, η συλλογή ξεκινά με τη δεύτερη μερίδα σε ένα δοχείο, το οποίο συνιστάται να διατηρείται στο ψυγείο.

Η τελευταία μερίδα συλλέγεται το πρωί. Μετά από αυτό, πρέπει να μετρήσετε τον όγκο, στη συνέχεια να ανακατέψετε καλά και να ρίξετε μια μερίδα όχι περισσότερο από 50 ml σε ένα βάζο. Αυτό το δοχείο πρέπει να υποβληθεί στο εργαστήριο. Ένα ειδικό έντυπο απαιτεί να αναφέρετε τα αποτελέσματα του συνολικού όγκου των ημερήσιων ούρων, καθώς και το ύψος και το βάρος του ασθενούς.

Χρησιμοποιώντας δοκιμαστικές ταινίες

Η δοκιμή για πρωτεΐνη στα ούρα λειτουργεί με βάση την αρχή των δεικτών. Οι ειδικές λωρίδες μπορούν να αλλάξουν χρώμα ανάλογα με τη συγκέντρωση πρωτεΐνης. Είναι βολικά για τον προσδιορισμό αλλαγών που συμβαίνουν σε διαφορετικές χρονικές στιγμές και χρησιμοποιούνται τόσο στο σπίτι όσο και σε οποιαδήποτε ιατρικά και προληπτικά ιδρύματα.

Οι δοκιμαστικές ταινίες ούρων χρησιμοποιούνται όταν είναι απαραίτητο να προσδιοριστούν έγκαιρα και να παρακολουθηθούν τα αποτελέσματα της θεραπείας για παθολογίες του ουρογεννητικού συστήματος. Αυτή η διαγνωστική τεχνική είναι ευαίσθητη και αντιδρά στη λευκωματίνη σε συγκέντρωση από 0,1 g/l και σας επιτρέπει να προσδιορίσετε ποιοτικές και ημιποσοτικές αλλαγές στην περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη στα ούρα.

Με βάση τα αποτελέσματα αυτής της διάγνωσης, μπορείτε να παρακολουθήσετε την αποτελεσματικότητα της θεραπείας, να κάνετε τροποποιήσεις σε αυτήν και να συνταγογραφήσετε την απαραίτητη δίαιτα.

Τόσο ο ποιοτικός όσο και ο ποσοτικός προσδιορισμός της πρωτεΐνης στα ούρα είναι σημαντικός για την κλινική.

Ποιοτικές εξετάσεις για τον προσδιορισμό της πρωτεΐνης στα ούρα
Περισσότερες από 100 αντιδράσεις έχουν προταθεί για τον ποιοτικό προσδιορισμό της πρωτεΐνης στα ούρα. Τα περισσότερα από αυτά βασίζονται στην κατακρήμνιση πρωτεϊνών με φυσικά (θέρμανση) ή χημικά μέσα. Η παρουσία πρωτεΐνης επιβεβαιώνεται από την εμφάνιση θολότητας.

Χρωματομετρικά ξηρά δείγματα παρουσιάζουν επίσης ενδιαφέρον.

Μόνο τα πιο σημαντικά τεστ για εξάσκηση θα περιγραφούν παρακάτω.

Δοκιμή με σουλφοσαλικυλικό οξύ. Σε αρκετά χιλιοστόλιτρα ούρων προσθέστε 2-4 σταγόνες διαλύματος σουλφοσαλικυλικού οξέος 20%. Εάν η αντίδραση είναι θετική, εμφανίζεται θολότητα. Το αποτέλεσμα προσδιορίζεται με τους όρους: ωχρότητα, ασθενώς θετική, θετική ή έντονα θετική αντίδραση. Το τεστ σουλφοσαλικυλικού οξέος είναι ένα από τα πιο ευαίσθητα τεστ για την ανίχνευση πρωτεΐνης στα ούρα. Ανιχνεύει ακόμη και τις πιο μικρές παθολογικές αυξήσεις της πρωτεΐνης στα ούρα. Χάρη στην απλή τεχνική του, αυτό το τεστ βρήκε ευρεία εφαρμογή.

Δοκιμή με aseptol. Το Aseptol είναι υποκατάστατο του σουλφοσαλικυλικού οξέος. Μπορεί να παρασκευαστεί από υλικά διαθέσιμα σε οποιοδήποτε εργαστήριο (φαινόλη και θειικό οξύ). Ως αντιδραστήριο χρησιμοποιείται διάλυμα Aseptol 20%. Η δοκιμή πραγματοποιείται ως εξής: σε δοκιμαστικό σωλήνα που περιέχει 2-3 ml ούρων, προσθέστε 0,5-1 ml διαλύματος ασεπτόλης στον πυθμένα. Εάν ένας λευκός δακτύλιος πηγμένης πρωτεΐνης εμφανιστεί στη διεπιφάνεια μεταξύ των δύο υγρών, το δείγμα είναι θετικό.

Το τεστ Heller. Κάτω από μερικά χιλιοστόλιτρα ούρων προσθέστε 1-2 ml νιτρικού οξέος 30% (ειδικό βάρος 1,20). Εάν εμφανιστεί ένας λευκός δακτύλιος στο όριο και των δύο υγρών, το δείγμα είναι θετικό. Η αντίδραση γίνεται θετική εάν η περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη είναι μεγαλύτερη από 3,3 mg%. Μερικές φορές λαμβάνεται ένας λευκός δακτύλιος παρουσία μεγάλων ποσοτήτων ουρικών. Σε αντίθεση με τον πρωτεϊνικό δακτύλιο, ο ουρικός δακτύλιος δεν εμφανίζεται στο όριο μεταξύ των δύο υγρών, αλλά λίγο πιο πάνω. Η Larionova προτείνει τη χρήση διαλύματος νιτρικού οξέος 1% σε κορεσμένο διάλυμα επιτραπέζιου αλατιού ως αντιδραστήριο αντί για νιτρικό οξύ 30%. Αυτό έχει ως αποτέλεσμα μεγαλύτερη εξοικονόμηση νιτρικού οξέος.

Δοκιμή με θειούχο κάλιο σιδήρου και οξικό οξύ. Αυτή η αντίδραση καθιστά δυνατή τη διάκριση των πρωτεϊνών του ορού από τις νουκλεολευκωματίνες.

Ίσες ποσότητες ούρων χύνονται σε δύο δοκιμαστικούς σωλήνες. Σε ένα από αυτά προστίθενται μερικές σταγόνες διαλύματος οξικού οξέος 30%. Εάν το αποτέλεσμα είναι θολό σε σύγκριση με το σωληνάριο ελέγχου, τα ούρα περιέχουν νουκλεολευκωματίνη. Εάν δεν εμφανίζεται θολότητα, τα περιεχόμενα και των δύο δοκιμαστικών σωλήνων αναμειγνύονται και χωρίζονται ξανά σε δύο μέρη. Μερικές σταγόνες (η περίσσεια μπορεί να μετατρέψει ένα θετικό τεστ σε αρνητικό) διαλύματος 10% κίτρινου άλατος αίματος (θειούχο κάλιο σιδήρου) προστίθενται σε έναν από τους δύο δοκιμαστικούς σωλήνες. Παρουσία πρωτεϊνών ορού γάλακτος, λαμβάνεται θολότητα.

Σε περίπτωση συμπυκνωμένων ούρων που περιέχουν μεγάλες ποσότητες ουρικού οξέος και ουρικών αλάτων, θα πρέπει να πραγματοποιηθεί δοκιμή με θειούχο σίδηρο καλίου και οξικό οξύ μετά από προκαταρκτική αραίωση (2-3 φορές) των ούρων με νερό. Διαφορετικά, μπορεί να εμφανιστεί θολότητα λόγω καθιζάνοντος ουρικού οξέος.

Αυτό είναι ιδιαίτερα σημαντικό κατά την εξέταση των ούρων των βρεφών, τα οποία περιέχουν πολύ ουρικό οξύ και ουρικό οξύ.

Από τις άλλες ποιοτικές δοκιμές για πρωτεΐνη στα ούρα, με βάση την κατακρήμνιση πρωτεϊνών, έχουν χρησιμοποιηθεί τα ακόλουθα: δοκιμή βρασμού, Esbach, Purdy, Roberts, Almen, Balloni, Buro, Claudius, Corso, Dome, Goodmann-Suzanne, Jollet, Δοκιμές Exton, Kamlet, Kobuladze, Liliendahl-Petersen, Polacci, Pons, Spiegler, Tanre, Thiele, Brown, Tsushiya κ.λπ.

Κατά την παραγωγή δοκιμών υψηλής ποιότητας για πρωτεΐνη στα ούρα με βάση την κατακρήμνιση πρωτεΐνης, πρέπει να τηρούνται οι ακόλουθοι γενικοί κανόνες, η παραβίαση των οποίων οδηγεί σε σημαντικά σφάλματα στη μελέτη.

1. Τα ούρα που εξετάζονται πρέπει να είναι όξινα. Για μια αλκαλική αντίδραση, τα ούρα οξινίζονται ελαφρά με οξικό οξύ. Η παραγωγή δείγματος με αλκαλικά ούρα σε περιπτώσεις που χρησιμοποιείται οξύ ως αντιδραστήριο μπορεί να οδηγήσει σε εξουδετέρωση του οξέος και σε αρνητικό αποτέλεσμα σε θετική αντίδραση. Αυτό ισχύει ιδιαίτερα για τη δοκιμή σουλφοσαλικυλικού οξέος, καθώς το οξύ προστίθεται σε πολύ μικρές ποσότητες και μπορεί εύκολα να εξουδετερωθεί.

2. Τα ούρα που εξετάζονται πρέπει να είναι καθαρά.

3. Τα δείγματα για τον προσδιορισμό της πρωτεΐνης στα ούρα πρέπει πάντα να γίνονται σε δύο δοκιμαστικούς σωλήνες, ο ένας από τους οποίους χρησιμεύει ως έλεγχος. Χωρίς σωλήνα ελέγχου, ενδέχεται να μην παρατηρήσετε ελαφρά θολότητα κατά τη διάρκεια των αντιδράσεων.

4. Η ποσότητα του προστιθέμενου οξέος κατά τη διάρκεια της δοκιμής δεν πρέπει να είναι πολύ μεγάλη. Μια μεγάλη ποσότητα οξέος μπορεί να οδηγήσει στο σχηματισμό διαλυτής όξινης αλβουμίνης και να μετατρέψει ένα θετικό δείγμα σε αρνητικό.

Λόγω της απλής τεχνικής τους, τα χρωματομετρικά ξηρά δείγματα αξίζουν μεγάλης προσοχής. Αυτές οι δοκιμές χρησιμοποιούν την επίδραση που έχει η πρωτεΐνη στο χρώμα του δείκτη στο ρυθμιστικό διάλυμα (το λεγόμενο σφάλμα πρωτεΐνης των δεικτών). Μια λωρίδα διηθητικού χαρτιού εμποτισμένη σε όξινο ρυθμιστικό κιτρικού και μπλε βρωμοφαινόλης ως δείκτης βυθίζεται για λίγο στα ούρα. Το τεστ είναι θετικό εάν το χρώμα είναι μπλε-πράσινο. Συγκρίνοντας την ένταση του χρώματος με τα πρότυπα έγχρωμου χαρτιού, μπορούν να εξαχθούν ενδεικτικά και ποσοτικά συμπεράσματα. Το χαρτί ενδείξεων πωλείται σε ράβδους με τα αντίστοιχα πρότυπα χρώματος, παρόμοια με το χαρτί γενικής ένδειξης.

Μέθοδοι για τον ποσοτικό προσδιορισμό της πρωτεΐνης στα ούρα
Πολλές μέθοδοι έχουν προταθεί για τον ποσοτικό προσδιορισμό της πρωτεΐνης στα ούρα. Ακριβείς ποσοτικές μέθοδοι για τον προσδιορισμό των πρωτεϊνών σε βιολογικό υλικό δεν έχουν χρησιμοποιηθεί ευρέως για τον προσδιορισμό της πρωτεΐνης στα ούρα λόγω πολύπλοκων και εντατικών τεχνικών. Οι ογκομετρικές μέθοδοι, ιδιαίτερα η μέθοδος Esbach, έχουν γίνει ευρέως διαδεδομένες. Είναι πολύ απλά, αλλά, δυστυχώς, δεν είναι πολύ ακριβή. Οι μέθοδοι της ομάδας Brandberg-Stolnikov είναι επίσης βολικές για την κλινική, δίνοντας πιο ακριβή αποτελέσματα από τις ογκομετρικές μεθόδους με μια σχετικά απλή τεχνική. Εάν έχετε φωτόμετρο ή νεφελόμετρο, οι νεφελομετρικές μέθοδοι είναι επίσης βολικές.

Μέθοδος Esbach. Προτάθηκε από τον Παριζιάνο γιατρό Esbach το 1874. Τα ούρα και ένα αντιδραστήριο χύνονται σε ειδικό δοκιμαστικό σωλήνα (λευκωματόμετρο Esbach). Ο δοκιμαστικός σωλήνας σφραγίζεται με ελαστικό πώμα, αναδεύεται καλά (χωρίς ανακίνηση!) και αφήνεται σε όρθια θέση μέχρι την επόμενη μέρα. Μετράται η διαίρεση στην οποία φτάνει η στήλη του πρωτεϊνικού ιζήματος. Ο αριθμός που βρέθηκε δείχνει την περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη. Είναι πολύ σημαντικό με τη μέθοδο Esbach τα ούρα να είναι όξινα. Τα αλκαλικά ούρα μπορούν να εξουδετερώσουν τα όξινα συστατικά του αντιδραστηρίου και να αποτρέψουν την κατακρήμνιση πρωτεϊνών.

Πλεονεκτήματα της μεθόδου: είναι απλή και βολική στην πράξη.

Μειονεκτήματα: η μέθοδος είναι ανακριβής, το αποτέλεσμα επιτυγχάνεται σε 24 - 48 ώρες.

Μέθοδος Brandberg-Stolnikov. Βασίζεται στο ποιοτικό τεστ Geller. Το τεστ Heller μπορεί να χρησιμοποιηθεί για ποσοτικό προσδιορισμό, καθώς δίνει θετικό αποτέλεσμα όταν η περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη είναι πάνω από 3,3 mg%. Αυτή είναι η μέγιστη συγκέντρωση πρωτεΐνης κάτω από την οποία το δείγμα γίνεται αρνητικό.

Τροποποίηση των Ehrlich και Althausen. Οι Σοβιετικοί επιστήμονες S. L. Erlikh και A. Ya Althauzen τροποποίησαν τη μέθοδο Brandberg-Stolnikov, υποδεικνύοντας τις δυνατότητες απλοποίησης της μελέτης και εξοικονόμησης χρόνου στην παραγωγή της.

Η πρώτη απλοποίηση σχετίζεται με τον χρόνο εμφάνισης του δαχτυλιδιού. Ο ακριβής χρόνος εμφάνισής του προσδιορίζεται, χωρίς απαραίτητα να τηρείται το 2ο και το 3ο λεπτό.

Η δεύτερη απλοποίηση καθιστά δυνατό τον προσδιορισμό του είδους της αραίωσης που πρέπει να γίνει. Οι συγγραφείς απέδειξαν ότι η απαιτούμενη αραίωση μπορεί να προσδιοριστεί κατά προσέγγιση από την εμφάνιση του δακτυλίου που προκύπτει. Διακρίνουν κλωστή, πλατιά
και ένα συμπαγές δαχτυλίδι.

Από τις νεφελομετρικές μεθόδους, αξίζει να σημειωθεί Μέθοδος Kingsberry και Clark. Ρίξτε 2,5 ml διηθημένων ούρων σε ένα μικρό βαθμονομημένο κύλινδρο και συμπληρώστε με υδατικό διάλυμα σουλφοσαλικυλικού οξέος 3% έως 10 ml. Ανακατεύουμε καλά και μετά από 5 λεπτά φωτομετρούμε σε κυψελίδα 1 εκ. χρησιμοποιώντας κίτρινο φίλτρο, χρησιμοποιώντας νερό ως υγρό αντιστάθμισης. Με το φωτόμετρο Pulfrich, η εξαφάνιση που βρέθηκε, πολλαπλασιασμένη επί 2,5, δίνει την ποσότητα της πρωτεΐνης σε %o. Στην περίπτωση που ο δείκτης εξαφάνισης είναι πάνω από 1,0, τα ούρα αραιώνονται πρώτα 2 φορές, 4 φορές ή και περισσότερο.

Για να έχουμε μια σαφή ιδέα της ποσότητας των πρωτεϊνών που απεκκρίνονται στα ούρα, είναι απαραίτητο να προσδιορίσουμε όχι μόνο τη συγκέντρωσή τους σε ξεχωριστή μερίδα ούρων, αλλά και τη συνολική ημερήσια ποσότητα τους. Για να το κάνετε αυτό, συλλέξτε τα ούρα του ασθενούς για 24 ώρες, μετρήστε τον όγκο τους σε χιλιοστόλιτρα και προσδιορίστε τη συγκέντρωση πρωτεΐνης σε μια δόση των ημερήσιων ούρων σε g%. Η ποσότητα των πρωτεϊνών που απεκκρίνονται στα ούρα σε 24 ώρες προσδιορίζεται ανάλογα με την ημερήσια ποσότητα ούρων σε γραμμάρια.

Κλινική σημασία της πρωτεΐνης στα ούρα

Τα ανθρώπινα ούρα περιέχουν συνήθως ελάχιστες ποσότητες πρωτεΐνης, οι οποίες δεν μπορούν να προσδιοριστούν με συνήθεις ποιοτικές δοκιμές πρωτεΐνης ούρων. Η απέκκριση μεγάλων ποσοτήτων πρωτεΐνης, κατά την οποία τα συνηθισμένα ποιοτικά τεστ για πρωτεΐνη στα ούρα γίνονται θετικά, είναι ένα μη φυσιολογικό φαινόμενο που ονομάζεται πρωτεϊνουρία. Η πρωτεϊνουρία είναι φυσιολογική μόνο σε νεογνό, τις πρώτες 4-10 ημέρες μετά τη γέννηση. Η κοινώς χρησιμοποιούμενη ονομασία λευκωματουρία είναι εσφαλμένη, επειδή δεν απεκκρίνονται μόνο οι λευκωματίνες στα ούρα, αλλά και άλλοι τύποι πρωτεϊνών (σφαιρίνες κ.λπ.).

Η πρωτεϊνουρία ανακαλύφθηκε ως διαγνωστικό σύμπτωμα το 1770 από τον Cotugno.

Οι πιο σημαντικές λειτουργικές νεφρικές πρωτεϊνουρία στα παιδιά είναι οι εξής:

1. Φυσιολογική πρωτεϊνουρία του νεογνού. Εμφανίζεται στα περισσότερα νεογνά και δεν έχει δυσμενή σημασία. Εξηγείται από ένα αδύναμο νεφρικό φίλτρο, βλάβη κατά τη γέννηση ή απώλεια υγρών τις πρώτες ημέρες της ζωής. Η φυσιολογική πρωτεϊνουρία εξαφανίζεται την 4η-10η ημέρα μετά τη γέννηση (αργότερα σε πρόωρα μωρά). Η ποσότητα της πρωτεΐνης είναι μικρή. Είναι η νουκλεολευκωματίνη.

Η νεογνική λευκωματουρία που συνεχίζεται για μεγάλο χρονικό διάστημα μπορεί να είναι σύμπτωμα συγγενών έλξεων.

2. Αλβουμινουρία εγκεφαλικού επεισοδίου. Οφείλονται στην υπέρβαση του ορίου της φυσιολογικής ευερεθιστότητας του νεφρικού φίλτρου από σημαντικούς μηχανικούς, θερμικούς, χημικούς, ψυχικούς και άλλους ερεθισμούς - απώλεια υγρών στα βρέφη (πρωτεϊνουρία αφυδάτωσης), κρύο μπάνιο, άφθονη τροφή πλούσια σε πρωτεΐνες (διατροφική πρωτεϊνουρία). ψηλάφηση του νεφρού (ψηλαφητική λευκωματουρία), σωματική υπερκόπωση, φόβος κ.λπ.

Η λευκωματουρία εγκεφαλικού επεισοδίου εμφανίζεται πιο εύκολα σε παιδιά σε μικρή ηλικία από ό,τι σε μεγαλύτερα παιδιά και ενήλικες, καθώς τα νεφρά ενός βρέφους και του μικρού παιδιού ερεθίζονται πιο εύκολα. Η αφυδάτωση λευκωματουρία (διαταραχές σίτισης, αδυναμία υγρών, τοξίκωση, διάρροια, έμετος) παρατηρείται ιδιαίτερα συχνά σε βρέφη.

Η αλβουμινουρία εγκεφαλικού επεισοδίου είναι καλοήθης. Εξαφανίζονται αμέσως μετά την εξάλειψη των αιτιών που τις προκαλούν. Το ίζημα μερικές φορές περιέχει μεμονωμένα λευκοκύτταρα, εκμαγεία και ερυθροκύτταρα. Η πρωτεΐνη είναι πιο συχνά η νουκλεολευκωματίνη.

3. Ορθοστατική πρωτεϊνουρία. Αυτή η κατάσταση είναι χαρακτηριστική για παιδιά προσχολικής και σχολικής ηλικίας. Εμφανίζεται λόγω αγγειοκινητικών διαταραχών στην παροχή αίματος στο νεφρό. Χαρακτηριστικό της ορθοστατικής λευκωματουρίας (εξ ου και το όνομά της) είναι ότι εμφανίζεται μόνο όταν το παιδί είναι όρθιο, όταν η σπονδυλική στήλη βρίσκεται σε λόρδωτη θέση. Όταν ξαπλώνει εξαφανίζεται. Απελευθερώνεται νουκλεολευκωματίνη. Σε αμφίβολες περιπτώσεις, μπορείτε να καταφύγετε στο ορθοστατικό πείραμα, το οποίο αποτελείται από τα εξής: το βράδυ, μια ώρα πριν πάει για ύπνο, το παιδί αδειάζει την ουροδόχο κύστη. Το πρωί, όταν σηκώνεται από το κρεβάτι, βγάζει ξανά ούρα. Αυτά τα ούρα δεν περιέχουν πρωτεΐνη. Στη συνέχεια το παιδί τοποθετείται στα γόνατά του για 15-30 λεπτά με ένα ραβδί πίσω από την πλάτη του, ανάμεσα στους λυγισμένους αγκώνες και των δύο χεριών. Δημιουργείται μια λορδοτική θέση, η οποία οδηγεί στην απελευθέρωση πρωτεΐνης, χωρίς αλλαγές στο ίζημα.

Με την ορθοστατική λευκωματουρία μπορούν να απελευθερωθούν 8-10 g πρωτεΐνης την ημέρα.

Η οργανική νεφρική πρωτεϊνουρία έχει τη σημαντικότερη κλινική σημασία μεταξύ όλων των πρωτεϊνουρίας. Οφείλονται σε οργανικές νεφρικές παθήσεις (νεφρίτιδα, νέφρωση, νεφροσκλήρωση). Η πρωτεϊνουρία είναι ένα από τα πιο σημαντικά και πιο γνωστά συμπτώματα της οργανικής νεφρικής νόσου.

1. Σε οξεία και χρόνια σπειραματονεφρίτιδα, η πρωτεϊνουρία εμφανίζεται τακτικά. Η ποσότητα της πρωτεΐνης είναι μέτρια και δεν υπάρχει παράλληλη μεταξύ του βαθμού πρωτεϊνουρίας και της σοβαρότητας της νόσου. Αντίθετα, η χρόνια και πιο σοβαρή νεφρίτιδα εμφανίζεται συχνά με λιγότερη πρωτεΐνη από την οξεία νεφρίτιδα. Μετά από οξεία νεφρίτιδα, μερικές φορές για μεγάλο χρονικό διάστημα (χρόνια), ανιχνεύονται μικρές ποσότητες πρωτεΐνης στα ούρα, οι οποίες δεν έχουν καμία παθολογική σημασία («υπολειμματική λευκωματουρία»). Δεν πρέπει να ξεχνάμε ότι μπορεί να εμφανιστεί και «νεφρίτιδα χωρίς πρωτεϊνουρία». Μερικές φορές η πρωτεΐνη βρίσκεται σε μια μερίδα των ούρων, αλλά όχι σε μια άλλη. Η αναλογία λευκωματίνης προς γλοβουλίνη στην οξεία νεφρίτιδα είναι χαμηλή και στη χρόνια νεφρίτιδα είναι μεγαλύτερη.

2. Με τη νεφροσκλήρωση, η ποσότητα της πρωτεΐνης στα ούρα είναι πολύ μικρή.

3. Από όλες τις νεφρικές παθήσεις, η νέφρωση εμφανίζεται με τη σοβαρότερη πρωτεϊνουρία.

4. Σε λοιμώδεις και τοξικές καταστάσεις εμφανίζεται η λεγόμενη εμπύρετη και τοξική πρωτεϊνουρία. Πρόκειται για οξεία νέφρωση, στην οποία η ποσότητα της πρωτεΐνης είναι μικρή. Αυτή η ομάδα περιλαμβάνει επίσης πρωτεϊνουρία σε καταστάσεις σπασμών (σπασμοί), υπερλειτουργία του θυρεοειδούς αδένα, ίκτερο, εγκολεασμό, εντεροκολίτιδα, εγκαύματα, σοβαρή αναιμία κ.λπ. Αυτές οι λευκωματουρίες είναι καλοήθεις και περνούν γρήγορα (παροδική λευκωματουρία).

5. Όταν το αίμα λιμνάζει στα νεφρά, εμφανίζεται η λεγόμενη συμφορητική λευκωματουρία, η οποία είναι χαρακτηριστική στους καρδιοπαθείς στο στάδιο της απορρόφησης. Εμφανίζεται επίσης με ασκίτη και όγκους στην κοιλιά.

Σε εμπύρετη, τοξική και συμφορητική λευκωματουρία, η αυξημένη διαπερατότητα του νεφρικού φίλτρου είναι ιδιαίτερα έντονη. Σύμφωνα με ορισμένους συγγραφείς, πολλές από αυτές τις πρωτεϊνουρία συμβαίνουν χωρίς οργανική βλάβη στο νεφρικό παρέγχυμα.

Εξωνεφρική λευκωματουρίαπροκαλούνται συνήθως από ακαθαρσίες πρωτεΐνης (εκκρίσεις, σάπια κύτταρα), οι οποίες εκκρίνονται από άρρωστα ουροποιητικά και γεννητικά όργανα. Η εξωνεφρική λευκωματουρία είναι συχνότερη λόγω κυστεοπυελίτιδας (πυουρία), λιγότερο συχνά λόγω αιδοιοκολπίτιδας, λίθων και όγκων του ουροποιητικού συστήματος.

Με την εξωνεφρική λευκωματουρία, ένας μεγάλος αριθμός λευκοκυττάρων και βακτηρίων βρίσκεται στο ίζημα. Στοιχεία νεφρού δεν βρίσκονται σχεδόν ποτέ. Η ποσότητα της πρωτεΐνης είναι μικρή. Τα φιλτραρισμένα ή φυγοκεντρημένα ούρα συνήθως δεν είναι θετικά για πρωτεΐνη.

Σε όσους αναρρώνουν από πυελίτιδα, η λευκωματουρία εξαφανίζεται μετά από βακτηριουρία και πυουρία.

Θα πρέπει να τονιστεί ως χαρακτηριστικό φαινόμενο ότι στην πρώιμη παιδική ηλικία οι οργανικές νεφρικές παθήσεις εμφανίζονται εξαιρετικά σπάνια, επομένως η οργανική πρωτεϊνουρία είναι επίσης σπάνια. Από αυτά, υπάρχουν κυρίως πυρετικά και τοξικά. Σε αντίθεση με την οργανική πρωτεϊνουρία, η αλβουμινουρία εγκεφαλικού επεισοδίου είναι πολύ συχνή στα παιδιά σε μικρή ηλικία.

Στα μεγαλύτερα παιδιά, η οργανική πρωτεϊνουρία είναι πιο συχνά λειτουργική. Γενικά, με την ηλικία, η λειτουργική πρωτεϊνουρία εμφανίζεται λιγότερο συχνά και η οργανική πρωτεϊνουρία πιο συχνά.

Ηλεκτροφορητικές μελέτες πρωτεϊνών στα ούρα

Ορισμένοι συγγραφείς χρησιμοποιούν την ηλεκτροφορητική μέθοδο για τη μελέτη πρωτεϊνών στα ούρα (ουροπρωτεΐνες). Από τα ληφθέντα ηλεκτροφερογράμματα είναι σαφές ότι έχουν την ίδια ποιοτική σύνθεση με τις πρωτεΐνες του πλάσματος. Αυτό δείχνει ότι οι πρωτεΐνες στα ούρα προέρχονται από πρωτεΐνες του πλάσματος.

Οδηγίες

Ποιοτικές μέθοδοι για τον προσδιορισμό της πρωτεΐνης σε ούρο: Μέθοδος Geller, δοκιμή με διάλυμα σουλφοσαλικυλικού οξέος 20%, δοκιμή βρασμού κ.λπ. Ημιποσοτικές μέθοδοι: χρήση διαγνωστικών ταινιών δοκιμής για τον προσδιορισμό της πρωτεΐνης σε ούρο, μέθοδος Brandberg-Roberts-Stolnikov. Ποσοτικές μέθοδοι: θολωσιμετρικές και χρωματομετρικές.

Προσδιορισμός πρωτεΐνης σε ημερήσια δόση ούροσε συγκέντρωση 0,033 g/λίτρο ή περισσότερο είναι παθολογία. Κατά κανόνα, στην πρωινή μερίδα των ούρων η συγκέντρωση πρωτεΐνης δεν υπερβαίνει τα 0,002 g/l και την ημερήσια ούροη συγκέντρωση πρωτεΐνης δεν είναι μεγαλύτερη από 50-150 mg πρωτεΐνης.

Πηγές:

• προσδιορισμός της πρωτεΐνης στα ούρα

Τα ούρα είναι προϊόν του ανθρώπινου μεταβολισμού. Σχηματίζεται κατά τη διήθηση του αίματος στα νεφρά, γι' αυτό η σύνθεση των ούρων δίνει μια σαφή περιγραφή της κατάστασης του ανθρώπινου σώματος.

Τα ούρα είναι ένα σύνθετο διάλυμα που αποτελείται από περισσότερες από 150 ενώσεις. Ορισμένες συγκεκριμένες ουσίες, για παράδειγμα, ακετόνη, χολικά οξέα, πρωτεΐνη, γλυκόζη, μπορεί να υπάρχουν μόνο σε ορισμένες ασθένειες.

Για τον έλεγχο της ανθρώπινης υγείας, πρώτα απ 'όλα, είναι απαραίτητο να προσδιοριστεί η ποσότητα των ούρων. Ο κανόνας είναι η παραγωγή 1-1,8 λίτρων ούρων την ημέρα. Όταν απελευθερώνονται περισσότερα από 2 λίτρα ούρων, αυτό είναι σημάδι πιθανής διαταραχής στη λειτουργία των νεφρών, σακχαρώδη διαβήτη και μια σειρά άλλων ασθενειών. Εάν παράγονται λιγότερο από 0,5 λίτρα ούρων την ημέρα, υπάρχει απόφραξη του ουρητήρα ή της ουροδόχου κύστης.

Χρώμα ούρων

Το χρώμα των ούρων σας εξαρτάται από πολλούς παράγοντες και μπορεί να ποικίλλει από ανοιχτό κίτρινο έως πορτοκαλί. Η παρουσία ορισμένων αποχρώσεων μπορεί να επηρεαστεί από ορισμένα τρόφιμα, καθώς και από φάρμακα που λαμβάνονται από ένα άτομο.

Μετά τη λήψη φαρμάκων, τα ούρα μπορεί να χρωματιστούν και να πάρουν μια κοκκινωπή απόχρωση. Εάν ένα άτομο κινείται ενεργά και παράγει μεγάλη ποσότητα ιδρώτα, τα ούρα θα έχουν έντονο κίτρινο χρώμα, όπως όταν λαμβάνει προϊόντα όπως Nitroxoline ή Biomycin.

Εάν ένα άτομο δεν έχει πάρει χρωστικές τροφές ή φάρμακα, αλλά το χρώμα των ούρων του είναι διαφορετικό από το συνηθισμένο, μπορεί κανείς να υποψιαστεί την παρουσία κάποιας ασθένειας στο σώμα. Για παράδειγμα, με ηπατική νόσο, τα ούρα θα έχουν σκούρο κίτρινο ή πρασινωπό χρώμα.

Η παρουσία αίματος στα απεκκρινόμενα ούρα δείχνει ξεκάθαρα την παρουσία πέτρας ή νεφρικής αιμορραγίας, εάν παρατηρηθεί και πόνος.

Εάν η ούρηση είναι δύσκολη, αυτό μπορεί να υποδεικνύει μια φλεγμονώδη διαδικασία που προκαλείται από κάποιο είδος μόλυνσης στην ουροδόχο κύστη. Όμως τα βρώμικα και θολά ούρα υποδηλώνουν σοβαρή νεφρική νόσο.

Πρωτεΐνη στα ούρα

Δεν υπάρχει πρωτεΐνη στο αίμα ενός ατόμου ή η ποσότητα της είναι τόσο μικρή που δεν μπορεί να ανιχνευθεί με εργαστηριακές εξετάσεις. Εάν ανιχνευτεί πρωτεΐνη στα ούρα, είναι απαραίτητο να πραγματοποιηθούν επαναλαμβανόμενες δοκιμές, καθώς μπορεί να υπάρχει όταν ένα άτομο ξυπνά το πρωί, καθώς και μετά από βαριά σωματική εργασία ή άγχος στους αθλητές.

Είναι 100% αδύνατο να προσδιοριστεί οπτικά εάν υπάρχει πρωτεΐνη στα ούρα ή όχι. Μπορεί κανείς μόνο να μαντέψει πότε υπάρχει μεγάλη ποσότητα υπόλευκων νιφάδων στα ούρα.

Εάν η πρωτεΐνη ανιχνεύεται επανειλημμένα στα ούρα, αυτό δείχνει την παρουσία κάποιου είδους νεφρικής νόσου. Οι φλεγμονώδεις διεργασίες που συμβαίνουν σε αυτά προκαλούν μια ελαφρά αύξηση της ποσότητας πρωτεΐνης. Εάν περισσότερα από 2 γραμμάρια απεκκρίνονται στα ούρα, αυτό είναι ένα ανησυχητικό σήμα.

Η πυελονεφρίτιδα είναι μια φλεγμονώδης νόσος που προσβάλλει τη νεφρική πύελο, τους κάλυκες και το παρέγχυμα. Στις περισσότερες περιπτώσεις, η αιτία της φλεγμονής είναι μια βακτηριακή λοίμωξη. Η πλήρης ανάρρωση είναι δυνατή μόνο με έγκαιρη διάγνωση, επομένως, όταν εμφανιστούν συμπτώματα, απαιτείται ενδελεχής εξέταση.

Η σύνθεση του χώρου εργασίας για τον προσδιορισμό της πρωτεΐνης στα ούρα περιλαμβάνει τα ακόλουθα στοιχεία:

1. Δοκιμαστικοί σωλήνες χημικών, δοκιμαστικοί σωλήνες συγκόλλησης.
2. Σετ διαβαθμισμένες πιπέτες.
3. Πιπέτες με στενό τραβηγμένο άκρο.
4. Λαμπτήρες αλκοόλης ή καυστήρας αερίου.
5. Μαύρο χαρτί.
6. Παγόμορφο οξικό οξύ.
7. Σουλφοσαλικυλικό οξύ.
8. Συμπυκνωμένο νιτρικό οξύ.
9. Απεσταγμένο νερό.

Μέθοδοι προσδιορισμού πρωτεΐνης στα ούρα

Όλες οι μέθοδοι που χρησιμοποιούνται για τον ποιοτικό προσδιορισμό της πρωτεΐνης στα ούρα βασίζονται στην πήξη των πρωτεϊνών. Η πήξη των πρωτεϊνών εκδηλώνεται με διάφορους βαθμούς θολότητας (από ωχρότητα έως σοβαρή θολότητα) ή απώλεια νιφάδων.

Ο ποιοτικός προσδιορισμός της πρωτεΐνης στα ούρα μπορεί να πραγματοποιηθεί με έναν από τους ακόλουθους τρόπους:

1. βρασμό με διάλυμα οξικού οξέος 10%.
2. αντίδραση με διάλυμα σουλφοσαλικυλικού οξέος 20%.
3. αντίδραση με διάλυμα νιτρικού οξέος 50% (δοκιμή Geller).
4. αντίδραση με διάλυμα νιτρικού οξέος 1% σε κορεσμένο διάλυμα επιτραπέζιου αλατιού (τροποποιημένη δοκιμή Heller σύμφωνα με τη Larionova).

Πριν από τον ποιοτικό προσδιορισμό της πρωτεΐνης στα ούρα, διεξάγονται οι ακόλουθες προπαρασκευαστικές εργασίες:
1. Τα θολά ούρα φιλτράρονται μέσω ενός χάρτινου φίλτρου. Εάν δεν είναι δυνατό να ληφθεί ένα διαυγές διήθημα, διηθήστε το ξανά μέσω του ίδιου φίλτρου ή αναμείξτε τα ούρα με μια μικρή ποσότητα χώματος ή τάλκη από τον εγχυτήρα και στη συνέχεια φιλτράρετε.
2. Εάν τα ούρα είναι αλκαλικά, οξινίζονται με διάλυμα οξικού οξέος 10% σε ελαφρώς όξινη αντίδραση υπό τον έλεγχο λυχνίας ή γενικού χαρτιού δείκτη.
3. Με χαμηλή περιεκτικότητα σε αλάτι (ανοιχτόκίτρινα ή υποκίτρινα ούρα με χαμηλό ειδικό βάρος) σε κάθε
Προσθέστε μερικές σταγόνες κορεσμένου διαλύματος επιτραπέζιου αλατιού στο δείγμα, καθώς η έλλειψη αλάτων προκαλεί πήξη πρωτεΐνης.
4. Ο βαθμός θολότητας παρατηρείται χρησιμοποιώντας μαύρο φόντο. Ως φόντο χρησιμοποιείται μαύρο χαρτόνι ή μαύρο χαρτί που χρησιμοποιείται στη φωτογραφία. Λαμβάνοντας υπόψη την αντίδραση σε μαύρο φόντο, μπορείτε να προσδιορίσετε τον παραμικρό βαθμό θολότητας.

Οι αριθμημένοι δοκιμαστικοί σωλήνες τοποθετούνται σε ξεχωριστό ράφι. Εκτελούν μία από τις αντιδράσεις που περιγράφονται παρακάτω.

1. Δοκιμάζεται με βρασμό με διάλυμα οξικού οξέος 10%. Για να πραγματοποιήσετε αυτή τη δοκιμή, χρειάζεστε ένα διάλυμα οξικού οξέος 10%, το οποίο παρασκευάζεται ως εξής: 10 ml παγόμορφου οξικού οξέος τοποθετούνται σε έναν κύλινδρο και συμπληρώνονται με απεσταγμένο νερό μέχρι την ένδειξη 100 ml.

Τεχνική προσδιορισμού πρωτεϊνών. 10-12 ml διηθημένων ούρων ελαφρώς όξινης αντίδρασης τοποθετούνται σε χημικό δοκιμαστικό σωλήνα. Στη συνέχεια, το πάνω μέρος του δοκιμαστικού σωλήνα με ούρα θερμαίνεται προσεκτικά μέχρι να βράσει και προστίθενται σε αυτό 8-10 σταγόνες διαλύματος οξικού οξέος 10%. Ένας δοκιμαστικός σωλήνας με ούρα παρατηρείται σε μαύρο φόντο στο εκπεμπόμενο φως. Με την παρουσία πρωτεΐνης στα ούρα, εμφανίζεται θολότητα διαφόρων βαθμών (από ωχρότητα έως σοβαρή θολότητα) ή εμφανίζονται νιφάδες. Το κάτω μέρος του δοκιμαστικού σωλήνα, το οποίο δεν θερμάνθηκε, χρησιμεύει ως έλεγχος. Αυτή η δοκιμή ανιχνεύει την ποσότητα πρωτεΐνης ξεκινώντας από 0,015%o (%o - promille).

2. Αντίδραση με διάλυμα σουλφοσαλικυλικού οξέος 20%. Ένα διάλυμα σουλφοσαλικυλικού οξέος 20% παρασκευάζεται ως εξής: 20 g σουλφοσαλικυλικού οξέος διαλύονται σε 70-80 ml απεσταγμένου νερού, μεταφέρονται σε κύλινδρο των 100 ml και συμπληρώνονται με απεσταγμένο νερό μέχρι τη χαραγή. Το παρασκευασμένο αντιδραστήριο αποθηκεύεται σε σκούρο γυάλινο δοχείο.

Τεχνική προσδιορισμού πρωτεϊνών. 2-3 ml διηθημένων ούρων μιας ασθενώς όξινης αντίδρασης τοποθετούνται σε δύο δοκιμαστικούς σωλήνες ίδιας διαμέτρου, 3-4 σταγόνες διαλύματος σουλφοσαλικυλικού οξέος 20% προστίθενται σε έναν από τους δοκιμαστικούς σωλήνες, ο άλλος δοκιμαστικός σωλήνας χρησιμεύει ως έλεγχος. Εάν υπάρχει πρωτεΐνη στον δοκιμαστικό σωλήνα με το αντιδραστήριο, εμφανίζεται θολότητα ή πέφτουν νιφάδες πηγμένης πρωτεΐνης. Στο σωλήνα ελέγχου το υγρό παραμένει διαυγές. Το σουλφοσαλικυλικό οξύ, μαζί με την πρωτεΐνη του ορού, κατακρημνίζει αλβουμόζες (πεπτίδια), που είναι προϊόν διάσπασης πρωτεΐνης. Για να διευκρινιστεί η αιτία της θολότητας των ούρων, θερμαίνεται ένας δοκιμαστικός σωλήνας με ούρα. Η θολότητα που προκαλείται από το σχηματισμό πρωτεϊνών ορού γάλακτος αυξάνεται, ενώ η θολότητα που προκαλείται από την παρουσία λευκώματος εξαφανίζεται. Αυτή η δοκιμή έχει την ίδια ευαισθησία με την προηγούμενη.

3. Αντίδραση με διάλυμα νιτρικού οξέος 50% (δοκιμή Geller). Ένα διάλυμα νιτρικού οξέος 50% παρασκευάζεται ως εξής: Προστίθενται 50 ml απεσταγμένου νερού (αραίωση 1:1) σε 50 ml νιτρικού οξέος ειδικού βάρους 1,2-1,4.

Τεχνική προσδιορισμού πρωτεϊνών. 1 ml νιτρικού οξέος 50% χύνεται σε ένα στενό μικρό δοκιμαστικό σωλήνα (λάσπη συγκόλλησης). 1 ml διηθημένων δοκιμαστικών ούρων λαμβάνεται σε μια πιπέτα με στενό εκτεταμένο άκρο, τοποθετείται στο αντιδραστήριο και ο δοκιμαστικός σωλήνας μεταφέρεται σε κατακόρυφη θέση. Όταν υπάρχει πρωτεΐνη, εμφανίζεται ένας λευκός δακτύλιος στην επιφάνεια του υγρού. Ο χρόνος εμφάνισης του δακτυλίου και οι ιδιότητές του εξαρτώνται από την ποσότητα πρωτεΐνης: εάν υπάρχει λίγη πρωτεΐνη, ο δακτύλιος δεν εμφανίζεται αμέσως, επομένως η εμφάνισή του παρακολουθείται για 2,5-3 λεπτά. Η ελάχιστη ποσότητα πρωτεΐνης που προσδιορίζεται με αυτή τη μέθοδο είναι 0,033°/oo. Με χαμηλότερη περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη στα ούρα, δεν σχηματίζεται δακτύλιος. Τα αποτελέσματα της αντίδρασης καταγράφονται σε μαύρο φόντο στο εκπεμπόμενο φως.

4. Αντίδραση με διάλυμα νιτρικού οξέος 1% σε κορεσμένο διάλυμα επιτραπέζιου αλατιού - μια τροποποιημένη δοκιμή Heller (σύμφωνα με τη Larionova).Για τη διεξαγωγή της δοκιμής, χρησιμοποιήστε διάλυμα νιτρικού οξέος 1% παρασκευασμένο σε κορεσμένο διάλυμα επιτραπέζιου αλατιού (αντιδραστήριο Larionova). 35 g επιτραπέζιου αλατιού διαλύονται σε 100 ml απεσταγμένου νερού, το διάλυμα διηθείται, 99 ml του παρασκευασμένου κορεσμένου διαλύματος επιτραπέζιου αλατιού προστίθενται σε 1 ml πυκνού νιτρικού οξέος με ειδικό βάρος 1,2-1,4.

Τεχνική προσδιορισμού πρωτεϊνών το ίδιο όπως στην αντίδραση με διάλυμα νιτρικού οξέος 50% (δοκιμή Geller), αλλά αντί για 1 ml διαλύματος νιτρικού οξέος 50%, 1 ml αντιδραστηρίου Larionova χύνεται σε δοκιμαστικό σωλήνα και στρώνεται 1 ml ούρων. το. Η εμφάνιση ενός λευκού δακτυλίου στη διεπιφάνεια των υγρών υποδηλώνει την παρουσία πρωτεΐνης στα ούρα που εξετάζονται. Το τεστ Larionova είναι το ίδιο ευαίσθητο με το τεστ Heller.

5. Χρωματομετρική (ξηρή) δοκιμή για ποιοτικό προσδιορισμό πρωτεΐνης. Μια χρωματομετρική (ξηρή) δοκιμή για τον ποιοτικό προσδιορισμό της πρωτεΐνης στα ούρα βασίζεται στην επίδραση που έχει η πρωτεΐνη στο χρώμα του δείκτη σε ένα ρυθμιστικό διάλυμα.

Τεχνική προσδιορισμού πρωτεϊνών. Ένα κομμάτι χαρτί δείκτη που έχει σχεδιαστεί για τον προσδιορισμό της πρωτεΐνης βυθίζεται στα ούρα για μικρό χρονικό διάστημα. Το τεστ θεωρείται θετικό εάν το χαρτί γίνει μπλε-πράσινο.

Ποσοτικός προσδιορισμός πρωτεΐνης στα ούρα

Ο ποσοτικός προσδιορισμός της πρωτεΐνης στα ούρα βασίζεται στο γεγονός ότι όταν τα ούρα που περιέχουν πρωτεΐνη επιστρώνονται με διάλυμα 50% νιτρικού οξέος ή αντιδραστηρίου Larionova, σχηματίζεται ένας λευκός δακτύλιος στο όριο των δύο υγρών και εάν εμφανιστεί ένας διαυγής λευκός δακτύλιος σε 3 λεπτά, τότε η περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη είναι 0,033% o ή 33 mg σε 1000 ml ούρων. Η εμφάνιση ενός δακτυλίου νωρίτερα από 3 λεπτά υποδηλώνει υψηλότερη περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη στα ούρα.
Κατά τον ποσοτικό προσδιορισμό της πρωτεΐνης στα ούρα, ακολουθούνται οι ακόλουθοι κανόνες:

1. Ο ποσοτικός προσδιορισμός της πρωτεΐνης πραγματοποιείται μόνο σε εκείνα τα τμήματα των ούρων όπου ανιχνεύτηκε ποιοτικά.
2. Ο προσδιορισμός γίνεται με προσεκτικά φιλτραρισμένα ούρα.
3. Ακολουθείται αυστηρά η τεχνική στρωματοποίησης των ούρων δοκιμής με διάλυμα νιτρικού οξέος 50% ή αντιδραστήριο Larionova σε αναλογία αντιδραστηρίου προς ούρα (1:1).
4. Ο χρόνος εμφάνισης του δακτυλίου προσδιορίζεται χρησιμοποιώντας ένα χρονόμετρο: στον τελικό υπολογισμό της ποσότητας πρωτεΐνης, λαμβάνεται υπόψη ο χρόνος στρωματοποίησης των ούρων σε νιτρικό οξύ, που είναι 15 δευτερόλεπτα.
5. Η αραίωση ούρων πραγματοποιείται με βάση τις ιδιότητες του δακτυλίου. Σε αυτή την περίπτωση, κάθε επόμενη αραίωση ούρων παρασκευάζεται από την προηγούμενη.
6. Τα δαχτυλίδια αναγνωρίζονται σε μαύρο φόντο.

Οι πιο συνηθισμένες είναι δύο μέθοδοι για τον ποσοτικό προσδιορισμό της πρωτεΐνης στα ούρα: η μέθοδος Roberts-Stolnikov-Brandberg και η μέθοδος των S. L. Ehrlich και A. Ya.

1. Μέθοδος Roberts-Stolnikov-Brandberg.Σύμφωνα με αυτή τη μέθοδο, η ποσότητα πρωτεΐνης στα ούρα προσδιορίζεται με αραίωση έως ότου την επόμενη φορά που τα ούρα επιστρωθούν με διάλυμα νιτρικού οξέος 50% ή αντιδραστήριο Larion, ο δακτύλιος εμφανιστεί ακριβώς σε 3 λεπτά. Η ποσότητα της πρωτεΐνης υπολογίζεται πολλαπλασιάζοντας το 0,033% με το βαθμό αραίωσης των ούρων. Το αποτέλεσμα που προκύπτει εκφράζει την ποσότητα πρωτεΐνης σε χιλιοστόγραμμα ανά 1000 ml ούρων, δηλαδή σε προμίλια (%o).
2. Μέθοδος των S. L. Ehrlich και A. Ya.Μια σειρά σωλήνων συγκόλλησης τοποθετούνται σε μια βάση, στην οποία χύνεται πρώτα 1 ml διαλύματος 50% νιτρικού οξέος ή αντιδραστηρίου Larionova. Τα ούρα δοκιμής λαμβάνονται με μια ξεχωριστή, καθαρή, στεγνή πιπέτα με ένα στενό, τραβηγμένο άκρο και τοποθετούνται στο αντιδραστήριο, μετά την οποία ενεργοποιείται το χρονόμετρο. Ο χρόνος εμφάνισης του δακτυλίου παρακολουθείται με την τοποθέτηση του δοκιμαστικού σωλήνα σε μαύρο φόντο. Όταν εμφανιστεί το κουδούνισμα, το χρονόμετρο απενεργοποιείται.

Κατά τη στιβάδα των ούρων, ανάλογα με την ποσότητα της πρωτεΐνης, μπορεί να εμφανιστεί ένας συμπαγής, φαρδύς ή σαν κλωστή δακτύλιος. Ένας συμπαγής, φαρδύς δακτύλιος εμφανίζεται αμέσως μετά την επίστρωση των ούρων στο αντιδραστήριο. Ο δακτύλιος που μοιάζει με νήμα μπορεί να εμφανιστεί αμέσως, πριν περάσει ένα λεπτό ή μέσα σε ένα έως τέσσερα λεπτά.

Εάν εμφανιστεί ένας δακτύλιος σαν κλωστή μέσα σε ένα έως 4 λεπτά, δεν χρειάζεται να αραιώσετε τα ούρα!
Για να υπολογίσετε την ποσότητα πρωτεΐνης σε αυτή την περίπτωση, αρκεί να χρησιμοποιήσετε το σχέδιο πίνακα που προτείνουν οι συγγραφείς (Πίνακας 1).

Παράδειγμα 1.Όταν τα ούρα επιστρώθηκαν στο αντιδραστήριο, σχηματίστηκε ένας νηματοειδής δακτύλιος μέσα σε 2 λεπτά. Εάν ένας δακτύλιος είχε σχηματιστεί για 3 λεπτά, η ποσότητα της πρωτεΐνης θα ήταν 0,033%.

Σε αυτή την περίπτωση, ο δακτύλιος σχηματίστηκε νωρίτερα. Η αντίστοιχη διόρθωση, σύμφωνα με τον πίνακα σχεδίου, για χρόνο 2 λεπτών ισούται με 1+1/8. Αυτό σημαίνει ότι η πρωτεΐνη σε μια δεδομένη μερίδα ούρων θα είναι 1+1/8 φορές μεγαλύτερη από 0,033°/oo, δηλαδή 0,033%o X(1+1/8) = 0,037°/oo.

Όταν εμφανιστεί ένας δακτύλιος που μοιάζει με νήμα μέσα σε 1 λεπτό, δηλαδή μετά από 40-60 δευτερόλεπτα, κάντε μια αραίωση ούρων 1,5 φορές (2 μέρη ούρων + 1 μέρος νερό) και στη συνέχεια στρώστε ξανά τα αραιωμένα ούρα στο αντιδραστήριο και καταγράψτε την εμφάνιση του δαχτυλιδιού. Κατά τον υπολογισμό των αποτελεσμάτων, λαμβάνεται υπόψη ότι τα ούρα αραιώθηκαν 1,5 φορές.

Παράδειγμα 2.Μετά την επίστρωση ούρων αραιωμένων 1,5 φορές, εμφανίστηκε ένας δακτύλιος σαν κλωστή μέσα σε 2 λεπτά. Εάν ο δακτύλιος είχε εμφανιστεί στα 3 λεπτά, η πρωτεΐνη θα ήταν 0,033%. Η αντίστοιχη τροποποίηση σύμφωνα με τον πίνακα σχεδίου για χρόνο 2 λεπτών είναι 1+1/8. Η πρωτεΐνη στα ούρα περιέχει 0,033%oX1,5X(1+1/8) = 0,056%o.

Εάν εμφανιστεί αμέσως ένας δακτύλιος σαν κλωστή, τα ούρα αραιώνονται 2 φορές (1 μέρος ούρων + 1 μέρος νερό). Τα αραιωμένα ούρα τοποθετούνται ξανά στο αντιδραστήριο και η εμφάνιση ενός δακτυλίου σημειώνεται μετά από 1 λεπτό.

Παράδειγμα 3.Κατά την τοποθέτηση 2-πλάσιων αραιωμένων ούρων στο αντιδραστήριο, εμφανίστηκε ένας δακτύλιος σαν νήμα μετά από 1 λεπτό και 15 δευτερόλεπτα. Τότε η ποσότητα πρωτεΐνης στα ελεγμένα ούρα, κατ' αναλογία με προηγούμενους υπολογισμούς, θα είναι ίση με
0,033%оХ2Х(1+3/8) = 0,091%.
Εάν εμφανιστεί ένας φαρδύς δακτύλιος, τα ούρα αραιώνονται 4 φορές (1 μέρος ούρων + 3 μέρη νερό).
Με την επακόλουθη στρώση αραιωμένων ούρων, μπορεί να σχηματιστεί ένας δακτύλιος σαν νήμα τόσο πριν όσο και μετά από ένα λεπτό. Σε τέτοιες περιπτώσεις, η ποσότητα της πρωτεΐνης υπολογίζεται κατ' αναλογία με τα προηγούμενα παραδείγματα, δηλαδή 0,033% o πολλαπλασιάζεται με το βαθμό αραίωσης και την αντίστοιχη διόρθωση.

Παράδειγμα 1.Μετά την αραίωση των ούρων 4 φορές, ο δακτύλιος εμφανίστηκε αμέσως. Τα ούρα αραιώνονται 2 φορές. Μετά την επίστρωση ούρων αραιωμένων 8 φορές (4Χ2), σχηματίστηκε ένας νηματοειδής δακτύλιος μέσα σε 1,5 λεπτό. Στην περίπτωση αυτή, η ποσότητα της πρωτεΐνης είναι 0,033%oX8X1,25 = 0,33%o κ.λπ.
Όταν εμφανίζεται ένας συμπαγής δακτύλιος, τα ούρα αραιώνονται 8 φορές (1 μέρος ούρων + 7 μέρη νερό). Όταν τα αραιωμένα ούρα τοποθετηθούν στη συνέχεια στο αντιδραστήριο, μπορεί να σχηματιστεί ένας συμπαγής, φαρδύς ή σαν νηματώδης δακτύλιος.

Παράδειγμα 2.Όταν τα ούρα επιστρώθηκαν σε νιτρικό οξύ, σχηματίστηκε αμέσως ένας συμπαγής δακτύλιος. Τα ούρα αραιώνονται 8 φορές (1 μέρος ούρων + 7 μέρη νερό) και ξαναστρώνονται. Αυτό παρήγαγε πάλι ένα συμπαγές δαχτυλίδι. Στη συνέχεια, τα ούρα αραιώνονται άλλες 8 φορές (για να το κάνετε αυτό, πάρτε 1 μέρος των αραιωμένων ούρων σε έναν κύλινδρο ή δοκιμαστικό σωλήνα και προσθέστε 7 μέρη νερού σε αυτό). Μετά από άλλη μια στρώση αραιωμένων ούρων, σχηματίστηκε αμέσως ένας δακτύλιος σαν νήμα. Τα ούρα αραιώνονται 2 φορές (1 μέρος ούρων + 1 μέρος νερό). Μετά από άλλη μια στρώση αραιωμένων ούρων, σχηματίστηκε ένας δακτύλιος σαν νήμα μέσα σε 2 λεπτά. Η ποσότητα πρωτεΐνης σε μια δεδομένη μερίδα ούρων υπολογίζεται ως εξής: 0,033.%oX8X8X2X(1+1/8) = 4,8%o.

Εκτός από τον πίνακα σχεδίασης, υπάρχει ένας πίνακας με υπολογισμένους αριθμούς πρωτεΐνης (Πίνακας 2). Εάν τα ούρα δεν είναι αραιωμένα, τότε η ποσότητα της πρωτεΐνης βρίσκεται στη στήλη «Ολόκληρα, αδιάλυτα ούρα». Όταν αραιώνετε τα ούρα κατά ακέραιο αριθμό φορές (8,4,2), χρησιμοποιήστε τον πίνακα. 1. Όταν αραιώνετε τα ούρα 1,5 φορές, χρησιμοποιήστε τον πίνακα. 2.

Τεχνική για τη χρήση πίνακα για τον προσδιορισμό της περιεκτικότητας σε πρωτεΐνη στα ούρα

Στις κατάλληλες στήλες του πίνακα αναφέρετε τον χρόνο εμφάνισης του δακτυλίου και τον βαθμό αραίωσης των ούρων.
Ο αριθμός που βρίσκεται στη διασταύρωση των οριζόντιων και κάθετων γραμμών που σχεδιάζονται από αυτούς τους δύο δείκτες υποδεικνύει την ποσότητα πρωτεΐνης στα ούρα που εξετάζονται (%o).

Είναι πιθανό με ένα θετικό ποιοτικό τεστ για πρωτεΐνη, να μην σχηματίζεται δακτύλιος όταν επιστρώνεται με διάλυμα νιτρικού οξέος 50%. Αυτό σημαίνει ότι υπάρχει λιγότερο από 0,033% πρωτεΐνη στα ούρα. Σε τέτοιες περιπτώσεις, η ποσότητα πρωτεΐνης στη φόρμα ανάλυσης προσδιορίζεται με τον όρο «ίχνη».

Εάν η πρωτεΐνη προσδιορίζεται ποσοτικά, η περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη στο promille σημειώνεται στη φόρμα δοκιμής ούρων, για παράδειγμα, «πρωτεΐνη - 0,66%o».

Εκτός από τον ποσοτικό προσδιορισμό της πρωτεΐνης σε ξεχωριστή μερίδα ούρων, υπολογίζεται η ημερήσια ποσότητα της σε γραμμάρια. Για το σκοπό αυτό, συλλέγονται καθημερινά ούρα, μετράται η ποσότητα τους και προσδιορίζεται η περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη σε promille. Στη συνέχεια γίνεται ο υπολογισμός. Για παράδειγμα, η ημερήσια ποσότητα ούρων είναι 1800 ml, η πρωτεΐνη είναι 7°/oo. Αυτό σημαίνει ότι η ημερήσια ποσότητα ούρων περιέχει πρωτεΐνη: 1,8Χ7 = 12,6 γρ.